qPCR技术原理
实时荧光定量PCR(qPCR)技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。qPCR采用SYBR Green I(或Eva Green)染料法或探针法进行相对定量、绝对定量或microRNA定量检测。
qPCR送样要求:
材料种类 | 样品要求 | 起始量 | 保存及运输方式 |
血液 | 新鲜血液及抗凝剂处理的全血 | 1mL | -80℃保存,干冰运输 |
培养细胞 | 离心收集的细胞 | 1x107 | -80℃保存,干冰运输 |
动物组织 | 一般材料 | 100mg | -80℃保存,干冰运输 |
植物 | 一般材料 | 100mg | -80℃保存,干冰运输 |
RNA | OD260/OD280在1.9-2.1之间,完整性好 | ≥1μg | -80℃保存,干冰运输 |
DNA | OD260/OD280在1.7-1.9之间,完整性好 | ≥1μg | -20℃保存,冰袋运输 |
cDNA | 内参基因检测成功 | ≥20μL | -20℃保存,冰袋运输 |
提供结果
提供实验报告,含荧光扩增曲线、标准曲线原始数据等。