外泌体RNA测序
外泌体内含有与细胞来源相关的蛋白质和核酸,可以运输蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA 等进入受体细胞,参与细胞间通讯。不同细胞来源的外泌体所含有的蛋白成分和 RNA 不太相同,可作为多种疾病的早期诊断标记物,也能作为靶向药物的载体进行疾病治疗。
1)miRNA高通量分析
2)mRNA高通量分析
3)lncRNA高通量分析
4)circRNA高通量分析
小RNA测序文库采用了PE150测序方案,利用fastqc对测序文库的质量值进行评估。利用fastp进行序列两端N碱基的切除、q20过滤和adaptor切除。利用bowtie短序列比对工具比对Rfam库去除rRNA、tRNA等ncRNA,利用miRDeep2对小RNA进行定量统计,用DESeq2进行差异表达分析。
分析流程图如下所示:
样本要求
样品类型:
细胞、体液或RNA样品。其它类型样品请详询。
样品量:
①体液 全血、血清、血浆 :5 mL
②脑脊液:8mL
③尿液:100 mL
④细胞上清:50ml
⑤外泌体:100ul
保存和运输条件:
负八十长期保存,干冰运输。提取的外泌体在短时间(一周之内)使用,可以放在4度保存,如果长时间保存可以放在-80度保存。