短链脂肪酸检测

检测种类：

乙酸 

丙酸 

异丁酸 

丁酸 

异戊酸 

戊酸 

己酸

实验方案

1.1 试剂及仪器 

1.1.1 主要试剂 

磷 酸（国 药） ，乙 醚（国 药） ，乙 酸（ sigma≥99.5%） ，丙 酸（sigma>99.0%） ，丁 酸（sigma>99.0%），异丁酸（sigma>99.0%），戊酸（sigma>98.0%），异戊酸（sigma>99.0%）， 

己酸（阿拉丁≥99.5%），异己酸（sigma＞98%）。

1.1.2 主要仪器平台 

Agilent 6890N/5975B 气-质联用仪（安捷伦，美国） 

涡旋仪（QL-866）冷冻离心机（湘仪，H1850R） 

1.2 实验方法 

1.2.1 标准品配置 

量取乙酸、丙酸、丁酸、异丁酸、戊酸、异戊酸、己酸纯标准品适量，用乙醚配制成 0.05 μg/mL， 

0.1 μg/mL， 0.5 μg/mL，1 μg/mL， 5 μg/mL，10 μg/mL，25 μg/mL，50 μg/mL，100 μg/mL，250 μg/mL，500 μg/mL 十一个混合标准浓度梯度。短链脂肪酸的信息见表 2。母液及工作标准溶液均保存 于 0 ℃。

1.2.2 样品前处理 

取粪便 100mg，加 100μL15%磷酸，再加 250μg/mL 的内标（异己酸）溶液 100μL 和乙醚 400 μL 匀浆 1min，于 4℃ 12000 rpm 离心 10min，取上清上机测试。 

1.2.3GC-MS 检测方法

色谱条件：色谱柱 Agilent HP-INNOWAX 毛细管柱（30 m*0.25 mm ID*0.25 μm）；分流进样， 

进样量 1 μL，分流比 10:1。进样口温度 250 ℃；离子源温度 230 ℃；传输线温度 250 ℃，四极杆温度150 ℃。程序升温起始温度 90 ℃；然后以 10 ℃/min 升温至 120 ℃；再以 5 ℃/min 升温至 150 ℃；最 后以 25 ℃/min 升温至 250 ℃维持 2 min。载气为氦气，载气流速 1.0 mL/min。 

MS 条件：电子轰击电离（EI）源，全扫及 SIM 扫描方式，电子能量 70 eV。

样本要求：

动物组织 ≥ 0.2g

血清、血浆 ≥ 0.3ml

肠道内容物 ≥ 0.1g

粪便 ≥ 0.3g

细胞 ≥ 10*7 个

保存及运输条件：

液氮或负八十保存，干冰运输